Bovine parvovirus antibody detection kit

Bovine parvovirus antibody detection kit (enzyme-linked immunoassay).

User manual

Product name

Generic Name: Bovine Parvovirus Antibody Test Kit (Enzyme-Linked Immunoassay)

English name: Bovine Parvovirus Antibody Detection Kit (ELISA).

Packaging specifications

96T×1/box

Detection principle

This kit consists of a pre-coated enzyme-labeled plate, enzyme labels, and other supporting reagents, using enzyme-linked immunoassay (ELISA). ) Principle to detect bovine parvovirus antibodies in bovine serum and plasma samples. During the experiment, the control serum and sample to be tested are added to the microplate labeled plate. After incubation, if the sample contains bovine parvovirus antibodies, they bind to the antigen on the plate, and after washing to remove unbound components, Enzyme markers are then added to specifically bind to antigen-antibody complexes on the microplate labeled plates; Then, wash to remove unbound enzyme markers, add TMB substrate solution to the well, and react with the enzyme-labeled conjugate to form blue products. The depth of color development is positively correlated with the specific antibody content in the sample; After adding the termination solution to terminate the reaction, the product turns yellow; By measuring the absorbance value of each reaction well at a wavelength of 450nm using a microplate reader, it can be determined whether the sample contains bovine parvovirus antibodies.

Composition of the kit

Storage and expiration date

Store at 2~8°C, shelf life is 12 months.

After opening, please store the blanket board at 2~8°C away from light to avoid moisture. The usage period is 2 months.

Applicable instruments

Includes a 450nm wavelength microplate reader, 37°C constant temperature equipment, and adjustable micropipettes.

Sample preparation

1. Prepare serum from whole animal blood using conventional methods, ensuring the serum is clear, free of hemolysis, and free of contamination. Samples can be stored at 2~8°C for 1 week, and should be stored at -20°C for extended periods.

2. Prepare the corresponding number of small-scale EP tubes or serum dilution trays according to the sample quantity, and use the sample diluent to dilute the serum to be tested at a 50-fold fold dilution (e.g., add 4μ of serum). 196μ 1 L sample dilution solution, mix well) negative and positive controls do not require dilution.

3. Antes de usar, o detergente concentrado deve ser deixado em temperatura ambiente para dissolver o precipitado e, em seguida, diluído 20 vezes com água destilada ou deionizada para se tornar um detergente ativo (por exemplo, adicione uma parte de solução de lavagem concentrada a uma parte de água destilada ou deionizada).

Métodos de inspeção

1. Antes de usar, deixe o kit em temperatura ambiente por 30 minutos para que retorne à temperatura ambiente.

2. Pegue a quantidade necessária de lâminas etiquetadas para microplacas, coloque um poço para o controle negativo e um para o controle positivo, sele as lâminas não utilizadas o mais rápido possível e armazene-as entre 2 e 8 °C.

3. Adicione 100 μL dos controles negativo e positivo aos poços de controle negativo e positivo, respectivamente; adicione 100 μL da amostra diluída a cada poço.

4. Misture bem, cubra com a película protetora e incube em uma incubadora a 37°C por 30 minutos.

5. Retire o excesso de líquido dos orifícios, adicione 250 μl da solução de limpeza em cada orifício, lave uniformemente agitando por 60 segundos e descarte. Repita a lavagem 5 vezes e, após cada lavagem, seque o líquido com leves batidinhas.

6. Adicione 100 μL do marcador enzimático a cada poço e incube a 37 °C em local escuro por 30 minutos.

7. Retire o excesso de líquido dos orifícios, adicione 250 μl da solução de limpeza em cada orifício, lave uniformemente agitando por 60 segundos e descarte. Repita a lavagem 5 vezes e, após cada lavagem, seque o líquido com leves batidinhas.

8. De acordo com a quantidade da amostra, misture a solução reveladora de cor A e a solução B em proporções de volumes iguais para preparar a solução de trabalho do substrato, pronta para uso imediato. Adicione 100 μl a cada poço e incube a 37 °C em local escuro por 10 minutos.

9. Adicione 100 μL da solução de parada a cada poço, misture bem e meça o valor de absorbância (valor de DO) de cada poço a 450 nm .

Valores de referência

Em condições experimentais normais, a razão entre a densidade óptica (DO) do controle positivo e a DO do controle negativo é superior a 0,2.

Interpretação dos resultados dos testes

1. S/P = (DO da amostra - DO do controle negativo) / (DO do controle positivo - DO do controle negativo).

2. S/P ≥ 0,4 indica um resultado positivo.

3. 0,2

4. Quando S/P < ,

Limitações dos métodos de teste

1. Este kit destina-se apenas à avaliação qualitativa preliminar de anticorpos contra parvovírus em soro ou plasma bovino.

2. Este kit destina-se exclusivamente a fins de pesquisa e não deve ser utilizado em experiências clínicas ou em seres humanos.

Notas

1. É obrigatório o uso de luvas e roupas de proteção durante os experimentos, e os protocolos de desinfecção e isolamento devem ser rigorosamente seguidos e implementados. Todos os resíduos experimentais devem ser tratados como agentes infecciosos.

2. Os terrários são corrosivos e devem ser mantidos longe do contato com a pele e as roupas. Em caso de contato acidental, lave imediatamente com bastante água corrente.

3. Quando as placas de microtitulação forem retiradas da refrigeração, devem ser deixadas em temperatura ambiente antes de serem abertas. As placas não utilizadas devem ser armazenadas em sacos selados contendo dessecante.

4. Os detergentes concentrados tendem a cristalizar em baixas temperaturas e devem ser trazidos de volta à temperatura ambiente para completa dissolução durante o uso.

5. Ao lavar, preencha todos os orifícios com líquido para evitar que enzimas livres se acumulem nas aberturas e impeçam a limpeza.

6. As amostras utilizadas para os testes devem ser mantidas frescas.

7. Os resultados dos testes devem ser determinados com base nas leituras do leitor de microplacas.

8. Os componentes dos reagentes de lotes diferentes não devem ser misturados.